понедельник, 31 октября 2011 г.
среда, 26 октября 2011 г.
понедельник, 10 октября 2011 г.
суббота, 16 июля 2011 г.
Тромбоциты
Однако не всегда значительная тромбоцитопения имеет самостоятельное патологическое значение в происхождении геморрагических диатезов. Иногда явления кровоточивости могут развиться при нормальном количестве тромбоцитов, если они функционально неполноценны, а также при нарушениях в сосудистой системе или в биохимизме свертывающей системы крови.
Срок пребывания тромбоцитов в периферической крови составляет 5—8 дней; ежедневно обновляется 12—20 % общей массы кровяных пластинок. Определение количества тромбоцитов приобретает особенно большое значение при различных видах кровоточивости.
Метод подсчета тромбоцитов в мазке крови.
Принцип метода состоит в следующем. В мазке крови подсчитывают количество тромбоцитов по отношению к 1000 эритроцитов. Зная абсолютное число эритроцитов в 1 мкл крови, вычисляют количество кровяных пластинок в 1 мкл крови.Для предотвращения агглютинации кровяных пластинок на место укола пальца наносят каплю 14 % раствора сульфата магнезии. Выделившуюся каплю крови смешивают с магнезией и из смеси готовят мазки на предметных стеклах, которые окрашивают по Романовскому—Гимзе в течение 2—3 ч. Подсчет кровяных пластинок на 1000 эритроцитов производят под иммерсионной системой микроскопа с использованием сетчатого окуляра или вкладного окошка.
Электронно-автоматический метод подсчета тромбоцитов.
Тромбоциты можно подсчитывать в принципе на любом счетчике частиц типа "Культер" и "Целлоскоп". Существует, кроме того, аппарат "Культер", специально разработанный для подсчета тромбоцитов. Он дает показания количества пластинок в 1 мкл крови.Предварительно в специальную пластмассовую трубочку забирают цельную кровь и оставляют на некоторое время в вертикальном положении для оседания эритроцитов. Плазму, богатую тромбоцитами, разбавляют изотоническим раствором натрия хлорида и пропускают через счетчик, на передней шкале которого устанавливают показатель гематокрита. Через 8 с производят прямое считывание результата с цифрового указателя прибора. Прибор прост в обращении, высокопроизводителен и точен (ошибка не превышает 1 %).
prof-osmotr.ru
Ретикулоциты
Ретикулоцит — это эритроцит, содержащий базофильный компонент, выпадающий при суправитальной окраске в виде сеточки (ретикулума). По размеру он несколько больше нормоцита (9—11 мкм). В зависимости от густоты и расположения базофильного вещества (кислый коллоид РНК) различают пять групп ретикулоцитов.
У взрослого человека в периферической крови встречается от 2 до 10 ретикулоцитов на 1000 эритроцитов, т.е. 2—10%о, или 0,2—1%о, причем главным образом ретикулоциты 4-й и 5-й групп.
Ретикулоцитоз — симптом большинства анемий, особенно железодефицитной, острой постгеморрагической, гемолитической. Уменьшение количества ретикулоцитов свидетельствует об угнетении регенерации эритроидного ростка костного мозга. Это относится к гипо- и апластическим анемиям различного, в том числе профессионального происхождения (интоксикация бензолом, хроническая лучевая болезнь), а также к В12-фолиеводефицитным анемиям до начала патогенетического лечения.
Нарастание количества ретикулоцитов при гемолитической анемии свидетельствует об интенсивности гемолиза и отражает тяжесть основного заболевания. Последнее можно считать характерным и для некоторых профессиональных заболеваний, в частности для хронической интоксикации свинцом.
Метод суправитальной окраски бриллиантовым крезиловым синим. Каплю насыщенного раствора бриллиантового крезилового синего в абсолютном спирте наносят на хорошо вымытое, обезжиренное и подогретое стекло и делают из него тонкий мазок. На приготовленное стекло наносят каплю крови, делают тонкий мазок и сразу помещают стекло во влажную камеру. Мазки выдерживают 3—5 мин, затем высушивают на воздухе. Зернисто-ниточная субстанция ретикулоцитов окрашивается в фиолетово-синий цвет, четко выделяясь на зеленовато-голубоватом фоне эритроцитов.
Лучшая окраска ретикулоцитов достигается при применении способа Гейльмейера: в пробирке Видаля смешивают несколько капель крови с равным объемом 1 % раствора бриллиантового крезилового синего в изотоническом растворе натрия хлорида. Пробирку помещают на 1 ч во влажную камеру. Через час из капли смеси делают мазок на предметном стекле, фиксируют и подсчитывают ретикулоциты.
При том и другом методах подсчет ретикулоцитов производят на 1000 эритроцитов.
Эритроциты с базофильной зернистостью
Эритроциты с базофильной зернистостью — это эритроциты, в которых обнаруживается зернистость, выявляемая при исследовании мазков, окрашенных после обычной фиксации. В условиях патологической регенерации, например при отравлении свинцом и при пернициозной анемии, обнаруживают эритроциты (и нормобласты) с базофильной зернистостью (пунктацией) в виде зернышек разной величины. Следует помнить, что и при других профессиональных интоксикациях и заболеваниях (отравления ядами гемического действия, бензолом, сероуглеродом, хроническая лучевая болезнь и т.д.) могут также выявляться эритроциты с базофильной зернистостью (реже, чем при отравлении свинцом, но иногда в значительном количестве).
У здоровых людей, не имеющих в условиях производства контакта с вредными веществами, большое количество эритроцитов с базофильной зернистостью обнаруживается очень редко (обычно не более 500 на 1 000 000).
Эритроциты с базофильной зернистостью: метод темного поля
Наиболее часто для лабораторной диагностики используют метод темного поля. Эффект темного поля достигается путем замены обычного конденсатора темнопольным.
В поле зрения эритроциты отмечаются в виде ярких белых колец (контуров). Базофильная зернистость видна как ярко светящиеся мелкие зерна, покрывающие весь эритроцит и не выходящие за пределы его контура. Характер гранул может быть различным — от пылевидных до грубых оскольчатых.
Подсчет ведут на 10 000 эритроцитов — примерно 50 полей зрения после того, как найден первый эритроцит с базофильной зернистостью (обязательно указывать). В связи с большой чувствительностью метода темного поля по сравнению с микроскопией в светлом поле рекомендуется считать пределом числа эритроцитов с базофильной зернистостью у здоровых людей 900 на 1 000 000. Для свинцовой интоксикации характерны цифры 2000 и выше.
Окраска метиленовым синим
Мазок фиксируют 3 мин в метиловом спирте, затем после высушивания заливают краской (5 капель 1 % водного раствора метиленового синего на 20 мл водопроводной воды) на 1 ч. Краску сливают, мазок высушивают. При этом базофильная зернистость в эритроцитах приобретает фиолетово-синий цвет. Обычно считают 10 000 эритроцитов и отмечают количество эритроцитов с базофильной зернистостью.
Тельца Гейнца
Тельца Гейнца — круглые включения различных размеров, обнаруживаются в зрелых эритроцитах при отравлениях гемолитическими ядами (анилин, нитробензол, фенилгидразин, бертолетова соль). Выявляются при специальной суправитальной окраске.
Образование телец Гейнца
является результатом необратимых дегенеративных изменений в цитоплазме эритроцитов, а их наличие свидетельствует о глубоких функциональных нарушениях этих клеток. Тельца Гейнца вместе с содержащими их эритроцитами исчезают из периферической крови через несколько дней после прекращения контакта с токсичным агентом. Причина их образования точно не установлена. Одни авторы считают, что появление этих телец обусловлено повреждением молекул гемоглобина, в частности денатурацией отщепившегося от него глобина. Другие авторы связывают их появление с повреждением оболочек эритроцитов.
Окраска телец Гейнца
Реактивы: 1 г метилового фиолетового растворяют в 100 мл 0,6 % водного раствора натрия хлорида.
Приготовление препарата. К нанесенной на предметное стекло капле добавляют каплю раствора красителя. Капли перемешивают, накрывают покровным стеклом и помещают во влажную камеру на 1—3 ч при комнатной температуре. При микроскопировании с иммерсионным объективом удается обнаружить тельца Гейнца в виде небольших, округлых темно-фиолетовых включений, расположенных по периферии клеток.
Норма и оценка результатов исследования телец Гейнца.
В эритроцитах здоровых людей тельца Гейнца отсутствуют. При выраженных интоксикациях, главным образом различными метгемоглобинообразователями, почти в каждом эритроците обнаруживают 1—3 тельца диаметром 0,5—1,5 мкм.