Принцип метода основан на экстракции копропорфирина и копропорфириногена из мочи в кислой среде эфиром и на последующем окислении копропорфириногена в копропорфирин йодом, реэкстракции копропорфирина соляной кислотой при определении на спектрофотометре по разнице оптической плотности при трех длинах волн [Семенова Л.С. и др., 1988].
Реактивы:
- Уксусная кислота (концентрированная)
- Эфир
- 5 % раствор соляной кислоты
- 1 % спиртовой раствор йода.
Методика определения копропорфирина в моче
К 2 мл мочи в пробирке с притертой пробкой добавляют 0,2 мл уксусной кислоты, 5 мл эфира и взбалтывают в течение 1 мин. После разделения фаз пипеткой удаляют нижний водный слой.
К эфирному слою добавляют 5 мл раствора йода в соляной кислоте (смесь 5 % раствора соляной кислоты и 1 % спиртового раствора йода в соотношении 200 : 1) и взбалтывают в течение 1 мин. Эфирный слой отбрасывают. Пробирку с содержимым помещают в термостат при Т = —37 °С на 5 мин.
После термостатирования измеряют оптическую плотность раствора на спектрофотометре СФ-46 в кварцевых кюветах при трех длинах волн: 380; 402; 430.
Контрольным раствором служит 5 % раствор соляной кислоты.
Расчет по формуле:
КП = [2 х Е402 - (Е430+E380)] x 680 мкмоль/л на 1 г креатинина.
Нормальные величины копропорфирина:
до 64,0 мкмоль/л на 1 г креатинина.
Сообщения
